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支原体污染解决方案


支原体是一种类似细菌但不具有细胞壁的原核微生物,直径在 50-300 nm,可轻松通过一般滤膜(0.22 μm)混入培养系统中,普通的抗生素(如培养细胞常用的双抗)对它不起作用。支原体以寄生和共生方式存活,部分可能导致动物、植物宿主的病变。

支原体是细胞污染物中比较常见的一种,来源广泛,常见的主要来自培养试剂、人员操作、细胞间交叉污染及组织来源。受支原体污染的细胞生长会变慢,状态会变差,虽不会马上使细胞致死,但却会影响细胞内的各种参数,如改变细胞膜抗原性,改变细胞新陈代谢,干扰核酸的合成,改变 DNA 转染效率,导致染色体畸变等,这些影响会造成实验结果不准确,重复性差,甚至得出错误的结论。2013年业界顶级期刊《Nature》已正式要求投稿的文章如涉及细胞培养,都必须要进行支原体检测。此外,支原体污染检测也是生物药研发与生产的重要质控指标,必须在生物药产品开发的各个阶段进行,包括原材料、细胞库、病毒种子库、未加工的收获液材料和最终产品。


常见的支原体检测方法


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支原体不仅仅会影响细胞状态,在实验过程中受污染的支原体会成为感染源可以感染其它细胞,因此支原体的去除与预防也至关重要。亚洲必赢国际437app推出快速、高效的支原体检测试剂,高去除率、低毒性的去除试剂及使用方便、可替代双抗的预防试剂,全方位助力消除支原体污染。


支原体检测


TransDetect® PCR Mycoplasma Detection Kit

本产品通过 PCR 方法检测培养细胞等生物材料中的支原体,针对支原体 16S rRNA 序列保守区域设计特异引物,直接使用细胞培养液作为模板,特异性扩增支原体 DNA,具有操作简便、快速(2 小时内即可出结果)、 特异性强、灵敏度高的特点。

• 灵敏度高,可检测到低至 20 个拷贝的支原体 DNA。

• 特异性强,只扩增支原体 DNA,真核细胞和细菌 DNA 不被扩增。

• 操作简便,无需提取基因组 DNA,适合大量细胞样品的检测。

• 配有阳性对照与阴性对照,保证 PCR 检测结果的准确性。


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TransDetect® Luciferase Mycoplasma Detection Kit

本产品利用支原体中所特有的酶设计而成,该酶分解 MycoDetect Substrate 的同时将 ADP 转换成ATP,荧光素酶在 ATP 存在的条件下催化荧光素(luciferin)氧化发出生物荧光,通过检测生物荧光可 以表征细胞培养物是否存在支原体污染。由于检测的是真正具有生物活性的支原体,所以得到的结果 比 PCR 检测方法更加准确。该方法灵敏度高、操作简便、省时。


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支原体去除


 TransSafeTM Mycoplasma Elimination Reagent (TransMyco Plus) Kit

本产品包含两类抗生素组分,第一类抗生素干扰支原体的蛋白表达,第二类抗生素干扰支原体的 DNA复制,从而可以有效去除支原体污染。本产品对真核细胞干扰小,细胞毒性低,可以保持较高的细胞活率。

• 支原体清除效率高。

• 使用浓度低,细胞毒性小,适用细胞种类广。

• 使用方便,直接加入培养基中即可。


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支原体预防


TransSafeTM Mycoplasma Prevention Reagent

本产品是对支原体具有抑制作用的三种抗生素的混合物,分别为大环内酯类、四环素类和氟喹诺酮类衍生物抗生素,可以有效干扰支原体的蛋白表达和DNA复制。

• 支原体预防效果好,可以最大程度地避免支原体污染。

• 使用浓度低,细胞毒性小,适用细胞种类广。

• 使用方便,直接加入培养基中即可。

• 抗性范围广,可替代双抗预防常见的革兰氏阴性和阳性菌。


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